Биология. В 3-х томах. Т. 1

(Стадии 1-6 должны занять не более 5 мин.) (Из кн.: Bacteriology, Humphries, J., John Murray, 1974.)

1. Приготовьте мазок бактерий на предметном стекле. Для этого прокалите проволочную петлю в пламени горелки и охладите ее. Капните 1-2 капли водопроводной воды в центр чистого стекла. Слегка коснитесь петлей выбранной вами бактериальной колонии, полученной в предыдущем опыте; чтобы не загрязнить культуру, чашку приоткрывайте как можно меньше. Перенесите клетки на предметное стекло и осторожно помешайте каплю петлей. Размажьте клетки в виде тонкой пленки по стеклу, чтобы получилось пятно площадью около 3×1 см. Снова прокалите петлю. Очень важно добиться нужной толщины мазка. Мазок должен чуть-чуть опалесцировать и чаще оказывается слишком толстым, а не слишком тонким. Необходимо также, чтобы толщина мазка по всей поверхности была одинакова. Дайте мазку полностью высохнуть на воздухе (несколько минут).

2. Зафиксируйте мазок. Возьмите стекло пинцетом и в горизонтальном положении проведите его три раза через желтую часть пламени горелки. Очень важно не перегреть стекло. Простейший способ проверки правильности нагрева — после каждого проведения через пламя слегка коснуться стеклом руки. Если неприятного ощущения нет, то все делается верно. При фиксации бактериальные клетки гибнут в результате коагуляции цитоплазмы; кроме того, клетки прилипают к стеклу.

3. При окрашивании очень легко запачкать стол, поэтому процедуру лучше проводить на штативе, пристроенном над кюветой или кристаллизатором. Штатив можно сделать из двух стеклянных или металлических палочек, положенных строго горизонтально на края кюветы или кристаллизатора на расстоянии 5 см друг от друга. Всю систему проще всего настроить, если закрепить палочки пластилином. Залейте стекло раствором кристаллического фиолетового и оставьте на 30 с.